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            蛋白檢測



             一、蛋白質印跡(WB)技術服務:

            蛋白質印跡法(免疫印跡試驗)即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法,是將聚丙烯酰胺凝膠電泳分離后的蛋白質從凝膠中轉移至固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質檢測技術。

            技術服務優勢:

            1、在保證圖片結果美觀的同時,保證實驗結果準確,同批次樣品,至少做兩次實驗結果驗證。
            2、操作人員,有10年以上WB實驗操作經驗,實事求是,確保結果準確。
            3、公司硬件設施齊全,電泳凝膠成像設備全部為進口品牌,全部實驗公司內部完成,嚴格遵守商業保密規定,按時保質完成客戶的各項委托。

            實驗內容:

            客戶前期準備

            服務項目明細

            樣品種類

            樣品量

            需要準備的物品

            蛋白提取、蛋白定量、免疫印跡。

            細胞樣品

            ≥5×106

            ●請提供待檢測的樣品,以及檢測蛋白所需的一抗

            動物組織樣品

            ≥50mg

            交付內容及說明

            交付內容

            服務說明

            電子版數據 (包括檢測報告、western 結果圖、灰度分析圖等)

            1. 收到樣品后,會進行預實驗,如檢測結果與我們要求不符,將停止試驗并收取預實驗相關費用。
            2.實驗費用及周期是針對正常實驗樣品制定的,樣品特殊或樣品多時除外
            3.一組樣品總數為8個以下(含陰性對照)。

            報價及周期

            服務項目

            報價

            服務周期(不含快遞時間)

            蛋白提取

            25元/樣

            20個工作日

            Western blotting(含內參二抗,不含一抗)普通蛋白

            450元

            Western blotting(含內參二抗,不含一抗)磷酸化蛋白

            650元


            二、ELISA技術服務

            ELISA,即酶聯免疫吸附實驗,是利用抗原或抗體在聚苯乙烯微孔板上固相化和抗原或抗體酶標記的技術,利用抗原抗體的特異性結合原理,來驗證目標抗原或抗體量的多少。我公司ELISA團隊已參與開發多種商品化ELISA檢測試劑盒,對間接法、夾心法、競爭法ELISA都可熟練應用。我公司配備有進口多功能酶標儀和高性能化學發光檢測儀器,保證檢測結果準確。


            客戶前期準備

            客戶需提供檢測用試劑盒或待檢用抗體和包被用抗原??蛻籼峁┖郎y樣品的標本,相關樣品的采集方法及注意事項可以與我公司技術人員溝通,樣本類型和要求如下表:


            樣本類型

            樣本要求

            細胞培養上清

            離心去沉淀,收集上清,樣本量>500μl。

            組織勻漿

            建議液氮研磨,加入蛋白酶抑制劑,樣本量>500μl。

            細胞勻漿

            建議加入蛋白酶抑制劑,樣本量>500μl。

            血清、血漿

            運輸:加在緩沖液中(蛋白裂解液)低溫運輸,樣本量>500μl。

            其他類型樣品

            避免反復凍融,樣本量>500μl。

            ELISA檢測參考價格及項目周期

            服務項目

            服務時間

            報價

            服務內容

            交付結果

            ELISA檢測

            1-2周

            260元/板

            提供間接法ELISA、夾心法ELISA和競爭法ELISA的定性和定量測定。

            原始數據;數據分析結果;實驗報告包括實驗環境條件、所用儀器設備型號、標準曲線分析、樣本濃度,可直接用于論文撰寫;


            三、免疫共沉淀(Co-IP)技術服務:

            免疫共沉淀可對兩種已知蛋白是否存在相互作用進行驗證,也可以驗證在總蛋白中是否含有與已知蛋白相互作用的未知蛋白。其實驗方法為將靶蛋白A與目的蛋白B進行孵育,形成“靶蛋白-目的蛋白”復合物。將靶蛋白的特異性抗體與復合物共孵育,形成“抗體-靶蛋白-目的蛋白”復合物,利用ProteinA/G純化。通過結合western blot及質譜檢測等對兩種蛋白之間是否存在相互作用進行定性分析。



            客戶前期準備

            樣本類型

            樣本要求(細胞、組織、蛋白樣本)

            細胞樣本

            細胞懸液或貼壁細胞:每份樣本至少 2×107 細胞,在運輸前將培養液充滿整個容器,25T細胞瓶常溫運輸。

            凍存細胞:收獲培養的細胞后,離心去除培養液,PBS洗2次,立即置液氮中快速冷凍。液氮冷凍半小時后,保存于-80°C冰箱,干冰運輸。提供量至少 2×107 細胞。

            組織樣本

            組織樣品預處理: 采集新鮮組織,組織塊以PBS或生理鹽水清洗干凈,切為小塊,放入液氮或-80°C冰箱中保存。提供量動物組織>400mg/樣本,植物組織>2g/樣本。

            運輸:干冰運輸。

            蛋白樣本

            1. 裂解樣品總蛋白量>2ml/樣品;細胞樣品總蛋白濃度>1mg/ml;組織樣品總蛋白濃度10-15mg/ml。在實驗前會進行質檢,以保證其質量達到實驗要求;
            2. 在提取總蛋白時,加入蛋白酶抑制劑和磷酸蛋白酶抑制劑(尤其對于檢測磷酸化蛋白)。

            運輸:加在緩沖液中(蛋白裂解液)低溫運輸。

            客戶提供一抗

            運輸:依據說明書,一般4°C或-20°C運輸,嚴禁反復凍融。

            免疫共沉淀(Co-IP)價格及項目周期

            服務項目

            服務時間

            價格

            服務內容

            交付結果

            免疫共沉淀

            4-5周

            4500元/樣

            Co-IP, Western blot鑒定Co-IP實驗產物

            實驗報告,原始實驗數據

            質譜檢測

            4-5周

            3000元/樣

            質譜鑒定和驗證Co-IP實驗產物

            質譜鑒定結果

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